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肺炎衣原體ELISA法檢測步驟
更新時間:2015-12-09   點擊次數:845次

    肺炎衣原體(ti) 感染廣泛存在於(yu) *,以隱性感染為(wei) 主。其臨(lin) 床表現多樣,主要引起人非典型肺炎,還可引起咽炎、支氣管炎、虹膜炎、肝炎、心內(nei) 膜炎及結節性紅斑等,亦是艾滋病、白血病等疾病繼發感染的重要病原,且與(yu) 冠心病的發生相關(guan) ,嚴(yan) 重威脅人類健康。常見檢查方法為(wei) ELISA法檢測肺炎衣原體(ti) 抗體(ti) 。

1. 配製洗滌液 l瓶濃縮洗滌液加475ml蒸餾水。配好的洗滌液短期內(nei) 可置室溫環境中,長期可存於(yu) 2—8℃環境中。
2. 配製酶聯物 按1:101倍稀釋,即取1u1濃縮酶聯物加酶聯物稀釋液1 000ul(根據檢測標本數量確定稀釋量),未用完的丟(diu) 棄。
3.待試劑盒平衡至室溫後,待測標本按1;51稀釋,即取4tA血清與(yu) 200u1標本稀釋液混合。

4. 將稀釋標本置37℃環境中20min。

5. 各加100ul陽性、弱陽性、陰性對照及已稀釋待測標本上清液於(yu) 相應孔中,空白對照孔加100u1標本稀釋液,蓋好反應板,置37℃環境中30min。

6. 甩盡板中液體(ti) ,每孔用200~300ul洗滌液洗5次,每次均需拍幹。

每孔加酶聯物100~1,蓋好反應板,置37℃環境中30min。

8.甩盡板中液體(ti) ,洗5次,每次拍幹。

9. 加底物A、B各1滴或各50tzl,混勻,置37℃環境中15min。
10.取出,加終止液1滴,用酶標儀(yi) 450nm測其OD值。若肉眼觀察則不加終止液,直接判斷結果。

注意事項:

1.本實驗結果須結合臨(lin) 床表現、病史作出診斷後,方可采取適當臨(lin) 床處理。

2 . 試劑盒雖然含有消除幹擾因子的物質,但仍可能有少量標本難以除盡幹擾。因此,如某標本多項IgM均為(wei) 陽性,應考慮RF的幹擾。

 

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