人GFAP 免疫組化試劑盒
    該試劑盒以HRP 標記的鏈黴親(qin) 和素複合物（HRP Streptavidin Conjugate，HRP-SA）為(wei) 基礎，可用於(yu) 檢測細胞、組織內(nei) 的特異性GFAP 。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強、定性定位準確、背景清晰。在所用的GFAP 一抗與(yu) 相應靶抗原結合後，用生物化二抗與(yu) 一抗特異性結合，zui後加入HRP-SA，形成抗原—特異一抗—生物素化二抗—HRP-SA 複合物，顯微鏡下觀察成像。
試劑盒所含試劑：
試劑A 通透液：0.1% Triton-X 100 10 mL（選用）
試劑B 封閉緩衝(chong) 液（封閉用） 20 mL
試劑C （*分裝）已稀釋的即用型GFAP 一抗（2.5ml）
試劑D （*分裝）生物素化羊抗兔IgG 1 支（濃度1.5 mg/mL，稀釋比為(wei) 1:300~1:500）100 μL+抗體(ti) 稀釋液20ml
試劑E HRP-SA 複合物1 支（濃度1 μM，稀釋比1:50~1:200）100 μL
試劑F DAB 顯色液5ml
用戶自備試劑：
1． 10mM TBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調pH 值至7.2~7.4，zui後定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween 20（0.05%體(ti) 積比）
2．抗原修複液（依檢測不同而選擇不同的修複液）10mM pH6.0 檸檬酸緩衝(chong) 液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調pH 值至6.0，zui後定容至1000mL或：0.5M EDTA 修複液（pH8.0）EDTA·2H2O 186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mM NaOH 調pH 值至8.0，zui後定容至1000Ml
3. 緩衝(chong) 甘油封固劑10 mL
4. Tween 20 5 mL
石蠟包埋組織切片免疫染色
實驗步驟（建議方案）：
石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置於(yu) 切片架上，於(yu) 60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2 次（每次2min），85%乙醇2 min；75%乙醇2min，自來水衝(chong) 洗，ddH2O 洗2×2min；
4.抗原修複： 根據抗體(ti) 說明書(shu) 推薦方法進行抗原修複，常采用高壓、微波（溫度達到98~100℃）或酶消化修複法，室溫自然冷卻，自來水衝(chong) 洗，ddH2O 洗2×
2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體(ti) 修複方法見附1）* 注：有些抗原勿需修複，直接進入第5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑B，37℃濕盒孵育30 min；
6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2 hr 或4℃；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑B，37℃濕盒孵育10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體(ti) 稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑Tween 20，37℃濕盒孵育封閉20 min；
12.加HRP-SA： 滴加用試劑C 稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20 nM），37℃濕盒中孵育30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應用DAB 溶液（試劑F）顯色；
15.複染：自來水充分衝(chong) 洗，複染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標本幹後，用試劑緩衝(chong) 甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。
注意事項：
1. 修複後緩衝(chong) 液須自然冷卻，自來水衝(chong) 洗後方能把切片取出，驟冷有可能導致結晶或抗原封閉。
2. 緩衝(chong) 液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩衝(chong) 液不能反複使用。
3. 若試劑為(wei) 微量濃縮液，用前應低速離心，將內(nei) 蓋和管壁附著的溶液離到底部。
4. 封片前一定要換用TBS 充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween 20，否則會(hui) 影響結果觀察。
5. 如須複染細胞核，則在封片前複染或直接采用含有染核試劑的封片劑進行封片。