(一)原理

    葡萄糖一6一磷酸酶(glucose-6-phosphatase)是滑麵內(nei) 質網的標誌酶。葡萄糖6一磷酸酶是糖異生途徑的關(guan) 鍵酶，其轉錄的多少，決(jue) 定著糖異生的速度。

(二)材料

1．標本組織切片。

2．Tris一馬來酸緩衝(chong) 液(pH6．5)

(1)A液：取Tris1．2g、馬來酸1．16g，溶於(yu) 100ml蒸餾水中。

(2)B液：0．2mol／LNaOH溶液(將0．8gNaOH溶於(yu) lOOml蒸餾水即成)。取A液25ml，B液約20ml，調pH至6．5後，加蒸餾水至100ml。

3．工作液須於(yu) 用前現配，如有沉澱，應過濾。其配製方法為(wei) ：0．125%D一葡萄糖一6一磷酸鈉鹽或鉀鹽20ml，0．2mol／L Tris一馬來酸緩衝(chong) 液(pH 6．5)20ml，3％醋酸鉛3ml，蒸餾水7ml。

4．0．1mol／L磷酸緩衝(chong) 液(含3％多聚甲醛)。

(三)方法

1．用含3％多聚甲醛的o．1mol／L磷酸緩衝(chong) 液於(yu) 4℃固定組織切片標本2min。

2．用蒸餾水洗5次，各2min。

3．置於(yu) 工作液中，37℃孵育15~20min。

4．用蒸餾水洗2次，各2min。

5．其餘(yu) 步驟同酸性磷酸酶染色步驟7～10。

6．對照設立對照的方法有兩(liang) 種：①在作用液中不加反應底物。②用口甘油磷酸鈉代替底物。

(四)結果

    酶活性部位有棕黑色沉澱，對照標本無此沉澱。