技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 滲漏缺陷型在推理育種中的應用
滲漏缺陷型在推理育種中的應用
更新時間:2016-01-20   點擊次數:3152次

(1)在初級代謝產(chan) 物推理育種中的應用 利用營養(yang) 缺陷型來阻斷代謝流或切斷支路代謝.使代謝途徑朝著有益產(chan) 物合成方向進行,還可以解除協同反饋效應,以積累支路代謝某一末端產(chan) 物。

①在直線式生物合成途徑中,營養(yang) 缺陷型不能累積終產(chan) 物,隻能累積中間產(chan) 物。一個(ge) 典型的例子是穀氨酸棒狀杆菌的精氨酸缺陷型突變株進行鳥氨酸發酵。由於(yu) 合成途徑中酶⑥的缺陷,導致必須供應精氨酸和胍氨酸,菌株才能生長。但這兩(liang) 種氨基酸的供應要維持在亞(ya) 適量水平,使菌體(ti) 維持較高水平,而又不引起終產(chan) 物對酶②的反饋抑製,從(cong) 而使鳥氨酸得以大量分泌累積。

②在分支式生物合成途徑中,營養(yang) 缺陷型導致協同反饋調節某一分支代謝途徑的代謝阻斷,使這一途徑的終產(chan) 物不能合成。例如次黃嘌呤核苷酸(肌苷酸)產(chan) 生菌是棒狀杆菌和短杆菌的腺嘌呤缺陷菌株,其合成途徑中酶③失活,控製*補給腺嘌呤核苷酸,可解除腺嘌呤核苷酸對酶①的反饋調節,由於(yu) 腺嘌呤核苷酸和鳥嘌呤核昔酸對酶①是協同反饋調節,故代謝流偏向鳥嘌呤核苷酸這一分支途徑。但鳥嘌呤核苷酸對酶②有反饋抑製和反饋阻遏作用,故肌苷酸得以分泌累積達12.8g/L。如果進一步使酶④缺失,則可使黃嘌呤核苷酸積累達6g/L。

    賴氨酸菌株之一是一株高絲(si) 氨酸缺陷菌株,由穀氨酸的北京棒狀杆菌ASl.299經硫酸乙二酯誘變處理後經篩選獲得的。可知,由於(yu) 高絲(si) 氨酸脫氫酶的基因發生突變,導致合成高絲(si) 氨酸的代謝途徑阻斷,消除了蘇氨酸和賴氨酸對天冬氨酸激酶的擠同反饋抑製,並使代謝流*流向賴氨酸方向,使賴氨酸產(chan) 量大幅度提高。

(2)在次級代謝產(chan) 物推理育種中的應用 營養(yang) 缺陷型導致初級代謝或次級代謝途徑阻斷,因此大多數導致能力下降;但在初級代謝產(chan) 物和次級代謝產(chan) 物的分支代謝途徑中,營養(yang) 缺陷型切斷初級代謝支路有可能使抗生素增產(chan) 。

    抗生素產(chan) 生菌除了產(chan) 生抗生素外,同時也產(chan) 生初級代謝產(chan) 物。當初級代謝途徑發生營養(yang) 缺陷型突變時,有時引起抗生素的超產(chan) 。如四環素、製黴菌素產(chan) 生菌的脂肪酸缺陷型可增產(chan) 抗生素。又氯酶素產(chan) 生菌的芳香族氨基酸營養(yang) 缺陷型導致氯黴素超產(chan) 。

    利用營養(yang) 缺陷型還可以產(chan) 生新產(chan) 品,如金黴素產(chan) 生菌的甲硫氨酸缺陷型,可以產(chan) 生去甲基金黴素。

一、滲漏缺陷型在推理育種中的應用

    滲漏缺陷型是一種特殊的營養(yang) 缺陷型.是一種遺傳(chuan) 性代謝障礙不*的突變型。其特點是酶的活力下降而不*喪(sang) 失,並能在基本培養(yang) 基上少量生長。在MM上生長特別慢而菌落小。既能少量地合成代謝產(chan) 物,又不造成反饋抑製。滲偏缺陷型的優(you) 點是不必添加*的缺陷營養(yang) 物。

    篩選方法:把大量營養(yang) 缺陷型菌株接種在基本培養(yang) 基上,挑選生長特別慢而菌落小的。

 

推薦收藏該企業網站