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elisa試劑盒白介素類封閉要*
更新時間:2018-03-28   點擊次數:1168次

  檢測抗體(ti) 多用間接型elisa。以純化抗原包被載體(ti) ,經4℃過夜,以無關(guan) 蛋白封閉至少2小時以上,加入待測樣品,室溫孵育1小時,洗滌幹淨後加酶標抗體(ti) ,再經室溫孵育、洗滌後,以底物顯色,顯色到一定程度終止反應,在酶標儀(yi) 上讀結果或以肉眼判斷。
   類型:elisa具體(ti) 方法的類型繁多,試劑的標準化問題還未zui後解決(jue) ,溫育的時間、溫度、洗滌液的種類及洗滌次數等都是影響測定的因素。但參考以上基本過程,無論怎樣變化,均離不開抗原-抗體(ti) 反應、酶標抗體(ti) 的免疫學反應及酶催化作用。
   特點:1、敏感性高,可檢出濃度在ug~mg/ml水平;2、特異性強;3、重複性好;4、快速、簡便、廉價(jia) 。
實驗條件
   固相載體(ti) :可作為(wei) 固相載體(ti) 的物質很多,如:纖維素、聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、聚丙烯、交聯葡聚糖、玻璃、矽橡膠、瓊脂糖凝膠等。可以各種形式出現;試管、微量反應板凹孔、小珠.....。zui常用的是聚苯乙烯製品,其吸附性。固相包被的機製一般不外乎物理吸附和共價(jia) 交聯,
封閉:以無關(guan) 蛋白占據載體(ti) 上未被包被的空隙,常用的封閉液是1%牛血清白蛋白或10%小牛血清。
待測樣品:稀釋度要合適,濃度太大會(hui) 發生非特異性吸附造成假陽性,過分稀釋會(hui) 影響抗原-抗體(ti) 之間的免疫學反應。選擇zui適稀釋度,在實驗體(ti) 係中取光密度在1.0左右的稀釋度為(wei) 宜。
酶結合物:使用高質量的酶結合物是elisa成功的關(guan) 鍵。
  注意事項
    酶聯免疫技術的試劑標準化問題尚未完*,溫育過程的時間、溫度、洗滌液的種類及洗滌次數都是影響zui後測定的因素。為(wei) 使實驗得到滿意的結果,在操作過程中應作到
1、每次試驗都必須設陽性和陰性對照。
2、封閉要*。
3、洗滌要測定。
200mg        137-08-6    泛酸鈣標準品
200mg        1400-61-9     製黴菌素標準品
200mg        151006-14-3     普伐他汀1,1,3,3-四甲基氨基丁烷標準品
200mg        1707-14-8     鹽酸芬美曲秦標準品
200mg        1808-12-4    溴馬秦標準品
200mg        191217-81-9     普拉克索鹽酸鹽標準品
200mg        23313-80-6    差向四環素標準品
200mg        25086-15-1     甲基丙烯酸共聚物C型標準品
200mg        25086-15-1     甲基丙烯酸共聚物B型標準品

 

 

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