本試劑盒僅(jin) 供研究使用 標本：血清或者血漿

試 劑 組 成
精密度微孔板96孔 （Microtitration Strips） 1塊 2～8℃幹燥保存
酶標偶合液 （Conjugate ） 1瓶 12.0毫升 2～8℃冷藏保存
標準品 （Standard） 5瓶 各1.0毫升 2～8℃冷藏保存
呈色劑A （Substrate A） 1瓶 6.0毫升 2～8℃避光冷藏保存
呈色劑B （Substrate B） 1瓶 6.0毫升 2～8℃避光冷藏保存
終止液 （Stopping Solution） 1瓶 6.0毫升 室溫保存
20倍濃縮洗滌液 （Rinsing Buffer x 20） 1瓶 60.0毫升 2～8℃冷藏保存
5倍濃縮樣品稀釋液 （Diluent x 5） 1瓶 15.0ml 2～8℃冷藏保存
英文說明書(shu) ，中文說明書(shu) 各一份 室溫保存

二、注意事項
1. 此試劑為(wei) 體(ti) 外檢測試劑，效期內(nei) 使用，試劑應視為(wei) 傳(chuan) 染物，不同總批號的試劑不能混用。
使用前應將盒內(nei) 各試劑取出。室溫放置至少30分鍾，
濃縮洗滌液出現結晶後，請於(yu) 37℃孵育15分鍾。
濃縮樣品稀釋液出現結晶後，請於(yu) 37℃孵育15分鍾
若24小時內(nei) 進行實驗，標本可存放於(yu) 2～8℃。不需及時實驗，標本-20℃保存，避免反複凍融。
在反複清洗微孔板，並扣幹微孔中的殘餘(yu) 液體(ti) ，否則將降低度，造成吸光度偏離的假像。
加樣完畢後，應注意輕微搖動微孔反應條，以便使孔中的液體(ti) 充分混勻。
試劑盒保存於(yu) 2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內(nei) 標示。

三、實驗前準備
1．使用前應將盒內(nei) 各試劑取出，室溫放置至少30分鍾。
2．準備各種實驗儀(yi) 器及材料，如微量移液器，吸頭，醫用蒸餾水等
3．濃縮洗液與(yu) 醫用蒸餾水1︰19倍稀釋後成為(wei) 應用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與(yu) 醫用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液
5．用應用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體(ti) 積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）

四、操 作 步 驟
1．取出酶標板，設空白孔，依照次序對應分別加入100μl的標準品於(yu) 空白微孔中（空白孔視為(wei) 0號標準品，用醫用蒸餾水替代）
2、分別標記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品於(yu) 空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）。
3、將酶標板置於(yu) 37℃溫育30分鍾；
4、將酶標板板取出，將其中的液體(ti) 甩去，每個(ge) 孔中全部加滿應用洗滌液後，立即甩去液體(ti) ;
5、每個(ge) 孔中加滿應用洗滌液後，輕微振搖酶標板30秒後將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍幹。
6、重複第5個(ge) 步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍幹。
7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。
8、將96孔板置於(yu) 37℃溫育30分鍾。
9、將酶標板取出，將其中的液體(ti) 甩去，每個(ge) 孔中全部加滿應用洗滌液後，立即甩去液體(ti) 。
10、每個(ge) 孔中再次加滿洗滌應用液後，室溫輕微振搖酶標板30秒後將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍幹。
11、重複第5個(ge) 步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍幹。
12、在每個(ge) 孔中加入底物A 50μl後立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。（A液、B液采用不同的吸頭加樣）
13、將酶標板置於(yu) 37℃避光溫育反應15分鍾。
14、每個(ge) 微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。
15、在酶標儀(yi) 上，450nm處測定OD; 顯色後，15分鍾內(nei) 進行測定。
16、根據製備的標準曲線，計算樣本含量

五、結 果 判 斷
1. 儀(yi) 器值：於(yu) 波長450nm的酶標儀(yi) 上讀取各孔的OD值；
2、檢測值範圍：0－40ng/ml
3、敏感度：0.1ng/ml