小鼠（mouse）補體(ti) C  

本試劑盒僅(jin) 供研究使用      標本：血清或者血漿

一、 試 劑 組 成

精密度微孔板96孔	（Microtitration Strips）	1塊	2～8℃幹燥保存
酶標偶合液	（Conjugate ）	1瓶 12.0毫升	2～8℃冷藏保存
標準品	（Standard）	5瓶 各1.0毫升	2～8℃冷藏保存
呈色劑A	（Substrate A）	1瓶 6.0毫升	2～8℃避光冷藏保存
呈色劑B	（Substrate B）	1瓶 6.0毫升	2～8℃避光冷藏保存
終止液	（Stopping Solution）	1瓶 6.0毫升	室溫保存
20倍濃縮洗滌液	（Rinsing Buffer x 20）	1瓶 60.0毫升	2～8℃冷藏保存
5倍濃縮樣品稀釋液	（Diluent x 5）	1瓶 15.0ml	2～8℃冷藏保存
英文說明書(shu) ，中文說明書(shu)		各一份	室溫保存

二、注意事項

1.  此試劑為(wei) 體(ti) 外檢測試劑，效期內(nei) 使用，試劑應視為(wei) 傳(chuan) 染物，不同總批號的試劑不能混用。

2． 使用前應將盒內(nei) 各試劑取出。室溫放置至少30分鍾，

3． 濃縮洗滌液出現結晶後，請於(yu) 37℃孵育15分鍾。

4． 濃縮樣品稀釋液出現結晶後，請於(yu) 37℃孵育15分鍾

5． 若24小時內(nei) 進行實驗，標本可存放於(yu) 2～8℃。不需及時實驗，標本-20℃保存，避免反複凍融。

6． 在反複清洗微孔板，並扣幹微孔中的殘餘(yu) 液體(ti) ，否則將降低度，造成吸光度偏離的假像。

7． 加樣完畢後，應注意輕微搖動微孔反應條，以便使孔中的液體(ti) 充分混勻。

8． 試劑盒保存於(yu) 2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內(nei) 標示。

三、實驗前準備

1．使用前應將盒內(nei) 各試劑取出，室溫放置至少30分鍾。

2．準備各種實驗儀(yi) 器及材料，如微量移液器，吸頭，醫用蒸餾水等

3．濃縮洗液與(yu) 醫用蒸餾水1︰19倍稀釋後成為(wei) 應用洗滌液

4．濃縮樣品稀釋液與(yu) 醫用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液

5．用應用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體(ti) 積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）

四、操 作 步 驟

1．取出酶標板，設空白孔，依照次序對應分別加入100μl的標準品於(yu) 空白微孔中（空白孔視為(wei) 0號標準品，用醫用蒸餾水替代）

2、分別標記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品於(yu) 空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）。 

3、將酶標板置於(yu) 37℃溫育30分鍾；

4、將酶標板板取出，將其中的液體(ti) 甩去，每個(ge) 孔中全部加滿應用洗滌液後，立即甩去液體(ti) ;

5、每個(ge) 孔中加滿應用洗滌液後，輕微振搖酶標板30秒後將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍幹。

6、重複第5個(ge) 步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍幹。

7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。

8、將96孔板置於(yu) 37℃溫育30分鍾。

9、將酶標板取出，將其中的液體(ti) 甩去，每個(ge) 孔中全部加滿應用洗滌液後，立即甩去液體(ti) 。

10、每個(ge) 孔中再次加滿洗滌應用液後，室溫輕微振搖酶標板30秒後將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍幹。

11、重複第5個(ge) 步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍幹。

12、在每個(ge) 孔中加入底物A 50μl後立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。（A液、B液采用不同的吸頭加樣）

13、將酶標板置於(yu) 37℃避光溫育反應15分鍾。

14、每個(ge) 微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。

15、在酶標儀(yi) 上，450nm處測定OD; 顯色後，15分鍾內(nei) 進行測定。

16、根據製備的標準曲線，計算樣本含量

五、結 果 判 斷

1. 儀(yi) 器值：於(yu) 波長450nm的酶標儀(yi) 上讀取各孔的OD值；

2、檢測值範圍：0－16mg/L 

3、敏感度：0.1 mg/L