用ELISA法挑選
怎樣靈活應用ELISA這個(ge) 檢測方法以及怎樣去挑選ELISA測試盒。ELISA這個(ge) 方法的原理,大家都很明白,網上的資料很多。可真正用起來的時候,偶然間就會(hui) 有點犯糊塗,我談一下自己的理解。
1、檢測方法簡單,靈敏度高,我個(ge) 人認為(wei) ELISA檢測血清或者培養(yang) 上清的細胞因子、胰島素、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測;病原體(ti) 抗原的定性與(yu) 定量;評估自己製備的血清抗體(ti) 的效價(jia) 等。很多客戶有個(ge) 誤區,拿來一個(ge) 指標就想當然地嚐試用ELISA去檢測,我還是建議多動腦,該檢測活性的檢測活性,該做western的做western。
2、對付一些小分子的檢測,例如:前線腺素、糖皮質激素的檢測,我的理解是要用競爭(zheng) 法ELISA去檢測,也要購買(mai) 采用這個(ge) 方法的盒試劑盒。xl18luck新利一般細胞因子的檢測,都是采用常規的夾心法ELISA檢測,由於(yu) 因子分子量比力大,一般10幾個(ge) KD左右,很容易找到兩(liang) 個(ge) 或多個(ge) 抗原表位。
而小分子很難找到兩(liang) 個(ge) 不通的表位,也就決(jue) 定了包被抗體(ti) 和檢測抗體(ti) 無法同時結合小分子並固相化。解決(jue) 方案便是酶標板上包被二抗,每個(ge) 孔加入一定量的酶標的小分子,然後加樣品,再加不帶標誌的檢測抗體(ti) ,顯色底物。樣品的目標小分子的含量越高,吸光度越低。
3、有些客戶會(hui) 用OVA(卵清卵白)做一些哮喘,過敏性腸炎的模型,然後會(hui) 檢測粘膜特異性的sIgA以及血清內(nei) 裏IgG,IgE等指標。
4、NO的檢測,一般都是采用經典的Greiss法,如今市場上竟然有NO xl18luck新利,真是徹夜未眠也搞不明白。另外還有做氧化應激指標MDA的檢測,我推薦ELISA測試盒。