酶聯免疫吸附試驗(Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA) 技術從(cong) 1970年代發展至今已近半個(ge) 世紀，是一項實驗室zui基本的免疫檢測技術，被廣泛的應用於(yu) 基礎研究和臨(lin) 床檢驗。那麽(me) 麵對市麵上數以千計的試劑盒，數百家供應商，對於(yu) 剛進入實驗室的新手或者準備開展ELISA實驗的人員， 又該如何選擇且質量又可靠的xl18luck新利呢？

1. 首先選定ELISA類型
ELISA技術可用於(yu) 測定抗原，也可用於(yu) 測定抗體(ti) 。 ELISA方法中有三個(ge) 必要的試劑：(1) 固相的抗原或抗體(ti) ，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；(2) 酶標記的抗原或抗體(ti) ，稱為(wei) "結合物"（conjugate）；(3) 酶反應的底物。
一般可將分為(wei) 以下幾種類型，實驗君首先需要根據自己的待檢物來確定試劑盒類型。
1)    雙抗體(ti) 夾心法：針對抗原分子上兩(liang) 個(ge) 不同抗原決(jue) 定簇的單克隆抗體(ti) 分別作為(wei) 固相捕獲抗體(ti) 和酶標檢測抗體(ti) 。適用於(yu) 測定二價(jia) 或二價(jia) 以上的大分子抗原如血漿中的細胞因子，不適用於(yu) 測定半抗原及小分子單價(jia) 抗原。同理，也有雙抗原夾心法測抗體(ti) 。
2)    直接法：將抗原直接固定在固相載體(ti) 上，加入酶標記的一抗，即可測定抗原總量。此法操作手續簡短，因無須使用二抗可避免交互反應。
3)    間接法：間接法是檢測抗體(ti) 常用的方法，其原理為(wei) 利用酶標記的抗抗體(ti) （抗人免疫球蛋白抗體(ti) ）來檢測與(yu) 固相抗原結合的待檢抗體(ti) 。
4)    競爭(zheng) 法：小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩(liang) 個(ge) 以上的位點，因此不能用雙抗體(ti) 夾心法進行測定，可以采用競爭(zheng) 法模式。當抗原材料中的幹擾物質不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時，可用此法檢測特異性抗體(ti) 。
2. 根據實驗物種及待檢樣品性質來選擇ELISA
如果實驗君的實驗樣品為(wei) 人、小鼠或大鼠樣品，那麽(me) 要選擇一個(ge) 合適的試劑盒相對容易，但如果您的實驗樣品來源於(yu) 其他物種如雞、牛、猴等，則市麵上能提供的試劑盒種類卻很少。且不可輕信能提供近萬(wan) 種試劑盒，覆蓋多物種的供應商。但如果又非要檢測這些物種的指標時，要對待檢物(如有種屬差異性)進行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應數據。對於(yu) 樣品類型而言，一般的商業(ye) 化試劑盒都經過血清、血漿和細胞培養(yang) 上清液的驗證。在選擇試劑盒時，要詳細閱讀說明書(shu) ，比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與(yu) 試劑盒兼容。另外，在某些情形下樣品中會(hui) 存在幹擾因素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(ti) (HAMA)、細胞培養(yang) 上清中含胎牛血清等。因此需根據樣品來選擇試劑盒，必要時還要根據樣本來適當優(you) 化。或在樣品收集前，先閱讀一些可靠供應商試劑盒的說明書(shu) 或直接谘詢。如果您的樣品為(wei) 組織或細胞裂解物，則需要更謹慎的選擇試劑盒。市麵上大多數的商業(ye) 化試劑盒沒有經過多種來源組織樣本的驗證。這需要實驗君能理解不是所有試劑盒所用的抗體(ti) 對，都能特異的從(cong) 一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白，還要考慮組織樣品的基質效應(Matrix Effect)等。

3. 細致比較試劑盒關(guan) 鍵性技術參數
xl18luck新利的關(guan) 鍵技術參數包括板內(nei) 差異性、板間差異性、批間差異性、重複性、特異性及交叉反應性、回收率等。如果實驗君經常開展ELISA實驗，建議使用同一的試劑盒，這樣可盡量保證數據的重複性(當然前提是實驗條件的一致性)。對於(yu) 科研用的定量xl18luck新利，不同的使用的抗體(ti) 對、酶以及底物、工藝和實力不盡相同，自然不同試劑盒測出的數據會(hui) 有差異。

4. 根據樣品中檢測物水平來選擇試劑盒
如果實驗君對於(yu) 樣品中待檢物的水平沒有任何可參考的數據，選擇寬動力學檢測範圍的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低，建議選擇高靈敏度的試劑盒。為(wei) 了降低基質效應，有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠超過試劑盒的檢測範圍（標曲範圍）， 也需做適當的倍數稀釋。在zui後計算結果時，需乘以相應的稀釋倍數。
5. 根據樣本可獲得性來選擇試劑盒
通常而言，商業(ye) 化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供應商的試劑盒對樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很珍貴或較難獲取，則需要認真考慮試劑盒對樣品用量的要求。如果樣品量少，且要做多因子檢測時更需謹慎。