在ELISA實驗中，用間接法測定抗體(ti) ，不能直接將待測抗體(ti) 直接用酶標記，然後直接加底物。而要加酶標抗抗體(ti) 呢？
如果將酶標記到待測抗體(ti) 上，相對經典的間接法更加繁瑣，而且您在摸索標記條件時不能保證操作失誤導致待測抗體(ti) 失活；酶標二抗現在是已經商品化了的，被大規模，購買(mai) 後使用方便。如果你的間接做的好的話，方法被優(you) 化了後，一抗二抗顯色，總共的時間加起來，出結果不會(hui) 超過2-3小時。
可以用直接ELISA法，就是用抗體(ti) 包板，在抗原上標記酶，然後顯色，這樣與(yu) 間接法相比就減少了一步，縮短了時間。
但是，直接法和間接法，他們(men) 各有優(you) 缺點，需要根據實驗具體(ti) 要求而定。
1.待測抗體(ti) 一般是免疫後產(chan) 生的抗體(ti) ，其中有免疫失敗和抗體(ti) 過少等因素存在，用酶標記有許多不確定性，如用酶標記前期有測不出效價(jia) 的可能，造成不必要的困惑。
2.ELISA酶聯免疫中酶標抗抗體(ti) 和抗體(ti) 結合後有巨大的信號放大作用，可以將信號擴大千倍以上，適合於(yu) 較低抗體(ti) 量的測定。
3.篩出單抗後可以考慮直接酶標抗體(ti) ，不過在確定測定體(ti) 係上要費不少功夫。