反應步驟。在建立進口xl18luck新利方法作反應動力學研究時，實驗表明，兩(liang) 次抗原 抗體(ti) 反應一般在37℃經1-2 小時，產(chan) 物的生成可達。為(wei) 避免蒸發，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，反應板不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。由於(yu) 公司的試劑盒溫育是在空氣浴中完成，采用水浴會(hui) 造成值偏高或花板。另外溫育中還有邊緣效應，邊上的值會(hui) 偏高，建議為(wei) 了客觀的判斷結果，將質控放在非邊緣位置。96孔酶標板結構特別；易產(chan) 生邊緣效應，抗原抗體(ti) 結合及酶促反應對溫度有嚴(yan) 格要求，酶標板周圍與(yu) 內(nei) 部孔升降溫速率不同，造成周邊與(yu) 內(nei) 部孔結果差異；幹浴與(yu) 水浴存在明顯的差異，盡可能使用水浴，並要求固相板放入水中，減少受熱不均，貼密封膜，防止汙物浸入。
洗滌在過程中雖不是一個(ge) ，但卻決(jue) 定著實驗的成敗。ELSIA試劑盒就是靠洗滌來達到分離遊離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與(yu) 固相抗原或抗體(ti) 結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附於(yu) 固相載體(ti) 的幹擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，而在洗滌時應把這種非特異性吸附的幹擾物質洗滌下來。可以說在ELISA 操作中，洗滌是zui主要的關(guan) 鍵技術，應引起操作者的高度重視，操作者應嚴(yan) 格按要求洗滌，不得馬虎。
⑴ 嚴(yan) 格按照試劑說明書(shu) 進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。
⑵ 加樣後及時放人孵箱。標本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴(yan) 格控製操作時間，防止孵育時間人為(wei) 延長，導致非特異性結合緊附於(yu) 反應孔周圍，難以清洗*。
（3）封板溫育時，各孔一定要封嚴(yan) ，防止陽性標本的液體(ti) 蒸發，產(chan) 生周邊現象從(cong) 而導致“花板"的出現。 
（4）用洗板機洗板時，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板後在吸水紙（選擇幹淨、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍幹：還要防止針口有纖維蛋白或異物，進口xl18luck新利這些異物在洗板的過程中易產(chan) 生拖帶現象而導致“花板"的出現。
（5）合理安排檢測量，以免反應板過多造成洗板等待時間長。
（6）加酶試劑後用吸水紙在酶標板表麵輕拭吸幹。
（7）顯色劑盡量在臨(lin) 用前配製，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
（8）加樣時保持顯色劑不外流；A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產(chan) 生氣泡。
（9）應保證酶標板清潔，整個(ge) 操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度。從(cong) 而提高檢測的特異性。並得到更準確、可靠的實驗結果。