所以任何的診斷離不開的原料，如抗原抗體(ti) ，酶等。以前用於(yu) 免疫測定的抗原通常為(wei) 各種純化抗原，而抗體(ti) 則為(wei) 純化抗原免疫動物後獲得的多克隆抗體(ti) 和使用雜交瘤技術得到的單克隆抗體(ti) ，而抗原或抗體(ti) 的標記物如酶標結合物則通過各種製備。近年來，隨著分子生物學的發展，使用基因工程方法製備各種特殊的抗原或抗體(ti) 及其酶結合物等免疫測定試劑幾成為(wei) 現實的新一代試劑，各種新型使用的測定方法也不斷出現。
1.1當標本采集保存不當產(chan) 生溶血時，紅細胞中的血紅蛋白釋放到血清中，血紅蛋白具有過氧化物酶的性質，其通過吸附或“PP效應"（蛋白質間相互吸附的現象）結合後，可催化A、B液顯色而造成假陽性1.2標本采集保存不當致細菌汙染，菌體(ti) 中可能含有內(nei) 源性HRP，會(hui) 產(chan) 生假陽性反應；標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG聚合，易使間接法的試驗本底加深。因此，標本宜在新鮮時檢測。
1.3反複凍融血清會(hui) 使抗體(ti) 效價(jia) 跌落，所以測抗體(ti) 的血清標本如需保存做多次檢測，宜少量分裝凍存。2、加樣
2.1如果 樣品稀釋液少加或血清多加，都會(hui) 引起本底增高。對於(yu) 間接法來說，受上述兩(liang) 個(ge) 因素影響更大。因為(wei) 血清中受檢的特異性IgG隻*IgG中的一小部分。IgG的吸附性很強，非特異性IgG可直接吸附到固相載體(ti) 上，有時也可吸附到包被抗原的表麵。這些非特異性的IgG均可以和酶標二抗發生反應而造成較高陰性本底或假陽性。如果加入的血清過多，高於(yu) 規定的稀釋倍數，極易造成高值陰性。反之，造成假陰性。
2.2  如果加入的酶結合物過多或加在較高的孔壁上或孔口，也會(hui) 引起本底升高或假陽性。
2.3如果血液未開始凝固或凝固不*時就強行離心分離血清，此時的血清中仍留部分纖維蛋白原，在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結果。
3.  溫育
3.1  由於(yu) ELISA試驗在一定溫度下的反應時間並不是反應的終點，溫育時間過短、溫度過低，易致顯色不全；溫育時間過長、溫度過高，易致非特異性結合緊附於(yu) 反應孔周圍，難以清洗*，產(chan) 生陰性高值或假陽性反應。因此，要嚴(yan) 格按規定的溫度和溫育時間進行。
3.2  由於(yu) 水浴較難將溫度控製在穩定的範圍，因此我們(men) 每次試驗時應認真觀察水浴箱的溫度，盡量少開啟水浴箱門，嚴(yan) 格控製水浴的溫度為(wei) 37±0.5。同時，微孔板不可重疊放置，以保證傳(chuan) 熱均勻，各板的溫度都能迅速達到平衡。
3.3  由於(yu) 通常設定的反應溫度為(wei) 37度，在這個(ge) 溫度下溫育一定時間，蒸發的水分會(hui) 很多，對於(yu) 整個(ge) 反應體(ti) 係來講，各種反應物的濃度會(hui) 不斷地增加，這樣必會(hui) 導致反應zui後的值升高。因此溫育時應貼上封板膠。
*        矽酸鈉    1克
進口/國產(chan)         錫酸鈉    5克
*    保存：-20℃    鎢酸鈉    50毫克
*    保存：-20℃    1-萘磷酸鈉鹽    0.25毫升
*    保存：-20℃    2-萘磷酸鈉鹽    1克
進口/國產(chan)         酒石酸氫鈉    5克
*    保存：-20℃    甲酸鈉    1克
*        月桂酸鈉    5克
*        油酸鈉    25克
進口/國產(chan)         硬脂酸鈉    100克
*    保存：-20℃    聚丙烯酸鈉    100毫克
*        巴比妥    500毫克
*        巴比妥鈉    1克
進口/國產(chan)     保存：-20℃    硫柳汞鈉    100毫克
*        *    500毫克