在操作過程中總是會(hui) 出現或大或小的問題，比如說花板、假陽性、全顯色、信號值比空白還低等等。
 下麵就由我拋磚引玉地來說一下，做xl18luck新利的經驗總結：
1、包被原的性質很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guan) 係到你做出的抗體(ti) 可不可以被其識別，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時，師兄都嚴(yan) 格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(ge) 道理。還有有的包被原可能不是蛋白，對於(yu) 生物素和脂類物質或小分子物質我們(men) 要事先對其改造再加以包被，我把方法簡要的列出如下：①親(qin) 和素生物素：先親(qin) 和素先包被載體(ti) ，加入生物素化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用於(yu) 。②脂類物質：可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解後加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風吹幹，待酒精揮發後，讓脂質自然幹固在固相表麵。③小分子必須依靠和大的蛋白載體(ti) 偶聯後才能固定在固相載體(ti) 上。
2、包被液的選擇，一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩衝(chong) 液。但有時由於(yu) 試驗的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的緩衝(chong) 溶液來包。應注意以下原理：xl18luck新利由於(yu) 蛋白質與(yu) 聚苯乙烯固相載體(ti) 是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與(yu) 固相載體(ti) 表麵的疏水基團間的作用，這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體(ti) 表麵。具體(ti) 的試驗還要有堅固的理論外也要實踐，看一下zui終可不可以應用到自己試驗當中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩衝(chong) 液，還有pH7.2的磷酸鹽緩衝(chong) 液和pH7-8的Tris-HCL緩衝(chong) 液等等。
3、封閉：繼包被之後用高濃度的無關(guan) 蛋白質溶液再包被的過程。封閉就是讓大量不相關(guan) 的蛋白質充填這些空隙，從(cong) 而排斥ELISA後的步驟中幹擾物質的再吸附。常用封閉劑有：0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明膠；脫脂奶粉，比較價(jia) 廉，可以高濃度使用（5%－10％）；還有一些稀有用到的各種動物血清 （主要為(wei) 了排除相似蛋白幹擾）和酪蛋白等等。但zui終選用什麽(me) ，要依據試驗具體(ti) 來實踐。
4、洗滌板：可以說在操作中，洗滌是zui主要的關(guan) 鍵技術。因為(wei) 聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，為(wei) 達到分離遊離的和結合的酶標記物的目的，清除殘留在板孔中遊離的物質，以及非特異性地吸附的幹擾物質，在洗滌時又應把這種非特異性吸附的幹擾物質洗滌下來。所以在洗板時會(hui) 有一定誤差，人為(wei) 因素很大（當然有條件的用洗板機除外），洗的不*或串了孔，對如此靈敏的xl18luck新利係統可是不小的影響。
中藥對照藥材    TLC法鑒別    120920-200103    馬兜鈴        3.0g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    120921-200506    木香        1.0g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    120922-200505    五味子(北五味子)        1.0g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    120923-200509    丹參        1.0g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    120924-200507    平貝母        5.0g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    120925-200407    白術        1.5g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    120926-200505    肉豆蔻        1.0g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    120927-200512    當歸        1.0g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    120928-200403    延胡索        1.0g