以 HRP標記的鏈黴親(qin) 和素複合物（HRP Streptavidin Conjugate，
HRP-SA）為(wei) 基礎，可用於(yu) 檢測血液,細胞、組織
CD40抗原。該試劑盒
、特異性強、定性定位    、背景清晰。在所用的 CD40一抗與(yu) 相
，用生物化二抗與(yu) 一抗特異性    ，zui後加   HRP-SA，形成抗
應靶抗原
原—特異一抗—生物素化二抗—HRP-SA複合物，顯微鏡下觀察成像。 
試劑盒所含試劑：
試劑A 通透液：0.1% Triton-X 100   10 mL（選用） 
試劑B 封閉
試劑C （*分裝）已稀釋的即用型CD40一抗（2.5ml） 
試劑D （*分裝）生物素化       IgG 1支 
（濃度1.5 mg/mL，稀釋     1:300~1:500）50 μL+抗體(ti) 稀釋液20ml 
（封閉用） 20 mL 
試劑E HRP-SA複合物1支（濃度1 μM，稀釋     1:50~1:200）100 μL 
試劑F DAB顯色液 5ml 
用戶自備試劑：
1． 10mM TBS（pH7.2~7.4） 
加蒸餾  800mL，濃鹽酸調pH值至7.2~7.4，zui後定容至1000mL 
TBS-T：TBS+Tween 20（0.05%體(ti) 積  ） 
2．抗原修複液（依檢測抗原不同而選擇不同的修複液） 
10mM pH6.0 檸檬酸
檸檬酸0.38g 
檸檬酸三鈉2.45g 
加蒸餾  900mL，濃鹽酸調pH值至6.0，該試劑盒以 HRP標記zui後定容至1000mL 
或：0.5M EDTA修複液（pH8.0） 
EDTA·2H2O 186.1g 
加蒸餾  700mL，用10mM NaOH調pH值至8.0，zui後定容至1000Ml 
3. 10 mL 
4. Tween 20 5 mL 
石蠟包埋組織切片
實驗步驟（建議方案）：
石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度 
1.烤片： 將待做切片
，於(yu) 60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr； 
3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
2.脫蠟： 切片放10 min； 
3.    ： 切片經下行酒精    ，無乙醇2 min；75%乙醇2min，自來5min，95%乙醇2次（每次2min），85%，ddH2O洗2×2min； 
4.抗原修複： 根據抗體(ti) 說明書(shu) 推薦方法進行抗原修複，常采用高壓、微波（溫
度達到98~100℃）或酶消化修複法，室溫自然    ，自來
2min，TBS洗滌（2×2min）。 
5.封閉： 滴加試劑B，37℃濕盒孵育30 min； ，ddH2O洗2×
1）* 注：有些抗原勿需修複，直接進
6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜； 
7.洗滌： TBS-T洗滌（3×5 min）； 
8.封閉： 滴加試劑B，37℃濕盒孵育10 min； 
9.加二抗： 滴加用抗體(ti) 稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30 min； 
10.洗滌： TBS-T洗滌（3×5 min）； 
11.封閉： 滴加試劑Tween 20，37℃濕盒孵育封閉20 min； 
12.加HRP-SA： 滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20 nM），37
℃濕盒中孵育30 min； 
13.洗滌： TBS-T洗滌（3×5 min），該試劑盒以 HRP標記TBS洗滌（2×5 min）； 
14.顯色：應用DAB溶液（試劑F）顯色； 
15.複染：自來，複染，脫  ，透明； 
16.封片： 待組織標本幹後，用試劑封片； 
亞(ya) 油酸甲酯標準品    112-63-0     5×50mg    Methyl Linoleate 
亞(ya) 油酯酰聚氧甘油酯標準品        100mg    Linoleoyl Polyoxylglycerides
亞(ya) 洲人參提取物粉標準品    50647-08-0     1．5g    Powdered Asian Ginseng Extract 
煙酸標準品    59-67-6    200mg    Niacin
煙酰胺標準品    98-92-0     500mg    Niacinamide (Vitamin B3)
延胡索酸泰妙菌素標準品    55297-96-6     250mg    Tiamulin Fumarate 
鹽酸阿的平標準品    6151-30-0     200mg    Quinacrine Hydrochloride 
鹽酸阿法羅定標準品    561-78-4    250mg    Alphaprodine Hydrochloride CII
鹽酸阿夫唑嗪標準品    81403-68-1    150mg    Alfuzosin Hydrochloride
鹽酸阿可樂(le) 定標準品    73218-79-8    100mg    Apraclonidine Hydrochloride
鹽酸阿米洛利標準品    17440-83-4    500mg    Amiloride Hydrochloride