果糖1,6二磷酸(FDP)測試盒

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果糖1,6二磷酸(FDP)測試盒測定意義(yi)

果糖1,6-二磷酸是機體(ti) 內(nei) 的高能代謝物和代謝調控劑，是糖酵解途徑的重要中間體(ti) ，廣泛存在於(yu) 動植物和微生物體(ti) 內(nei) ，能影響細胞內(nei) 鉀離子的濃度，改善葡萄糖和其他能量底物的代謝，促進組織氧的釋放，廣泛應用於(yu) 臨(lin) 床醫藥製劑。

測定原理

醛縮酶催化果糖1,6-二磷酸降解，產(chan) 物與(yu) DNPH縮合成紫紅色物質，在540nm有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀(yi) 器

天平、低溫離心機、研缽、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀(yi) 、微量石英比色皿/96孔板。
試劑組成和配製：

試劑一：液體(ti) ×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體(ti) ×1瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶（棕色），4℃避光保存。臨(lin) 用前加入667μL無水乙醇，蓋緊後充分混勻，再加入9.333 mL蒸餾水混勻，避光保存。

試劑四：粉劑×1管，4℃避光保存。臨(lin) 用前加1 mL蒸餾水，充分溶解。

標準品：粉劑×1瓶，臨(lin) 用前加10 mL蒸餾水，充分溶解。1μmol/mL標準液，4℃避光保存。

測定操作：

1. 分光光度計/酶標儀(yi) 預熱30 min，調節波長到570 nm，蒸餾水調零。

2. 空白管：取EP管，加入10μL蒸餾水，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻後蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置於(yu) 沸水浴中保溫15 min，冷卻後反複顛倒EP管數次，於(yu) 570nm測定吸光值，記為(wei) A空白管。顯色後務必在30min內(nei) 測完。

3. 標準管：取EP管，加入10μL標準品，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻後蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置於(yu) 沸水浴中保溫15 min，冷卻後反複顛倒EP管數次，於(yu) 570nm測定吸光值，記為(wei) A標準管。顯色後務必在30min內(nei) 測完。

4. 測定管：取EP管，加入10μL上清液，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻後蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置於(yu) 沸水浴中保溫15 min，冷卻後反複顛倒EP管數次，於(yu) 570nm測定吸光值，記為(wei) A測定管。顯色後務必在30min內(nei) 測完。

注意：空白管和標準管隻需要測定一次。

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