變異鏈球菌PCR檢測試劑盒說明書

本產(chan) 品是即用型PCR試劑盒的改良產(chan) 品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩衝(chong) 液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶隻需加入模板和引物即可進行PCR 反應，具有廣泛的用途。​

1. 方便，用戶隻需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷，操作步驟已經限度地簡化，能減少汙染，降低實驗誤差。
3. 本產(chan) 品A 型含電泳染料，PCR 反應液可直接上樣電泳，進一步簡化了操作。
4. 由於(yu) 各成分的濃度和比例都經過精心優(you) 化，反應的靈敏度高，特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chan) 物可直接用於(yu) T 載體(ti) 克隆，不需要額外的加A 反應。
使用及效果：將本產(chan) 品15 μL 與(yu) 用戶自備的模板，引物和水共15 μL 混合後，直接進行PCR反應（PCR 參數由用戶自己確定），反應結束後直接取10 μL 電泳檢查擴增結果。

以下是變異鏈球菌PCR檢測試劑盒說明書(shu) 的產(chan) 品介紹：

組成及試劑配製:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍幹品）： 2瓶，請臨(lin) 用前15分鍾內(nei) 配製。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好後室溫靜置大約10分鍾，同時反複顛倒/搓動以助溶解，其濃度為(wei) 200 U/L，然後做係列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配製成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為(wei) 空白孔 0 U/L。如配製100 U/L標準品：取0.3ml （不要少於(yu) 0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其餘(yu) 濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
使用及效果：
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決(jue) 定因素為(wei) ：
①引物與(yu) 模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與(yu) 保守性。
其中引物與(yu) 模板的正確結合是關(guan) 鍵。引物與(yu) 模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與(yu) 引物的結合(複性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chan) 物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從(cong) 100萬(wan) 個(ge) 細胞中檢出一個(ge) 靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個(ge) RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為(wei) 3個(ge) 細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好後，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chan) 物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性汙染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yang) 細胞，DNA 粗製品及總RNA均可作為(wei) 擴增模板。可直接用臨(lin) 床標本如血液、體(ti) 腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
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我公司即用型PCR試劑盒：
運輸及保存：低溫運輸、-20℃保存，有效期一年。