簡要描述:
糖原磷酸化酶b(GPb)測試盒)是糖原分解代謝的關(guan) 鍵酶,使糖原分子從(cong) 非還原端逐個(ge) 斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨(lin) 近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點前4個(ge) 葡萄糖基處。GP分為(wei) 有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩(liang) 種形式。
更新時間:2024-09-02;廠商性質:經銷商;覽量:1320
糖原磷酸化酶b(GPb)測試盒
商品詳情:
測定意義(yi) :
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關(guan) 鍵酶,使糖原分子從(cong) 非還原端逐個(ge) 斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨(lin) 近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點前4個(ge) 葡萄糖基處。GP分為(wei) 有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩(liang) 種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。
貨號 | 規格 | 檢測方法 |
YSH3411 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3411-1 | 50管/24樣 | 紫外分光光度法 |
測定原理:
GP催化糖原和無機磷產(chan) 生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)時測定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)時測定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。
需自備的儀(yi) 器和用品:
紫外分光光度計、台式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取:
1.按照組織質量(g):試劑一體(ti) 積(mL)為(wei) 1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然後轉移到1.5 mL EP 管中,蓋緊後(防止水分散失)置於(yu) 沸水浴提取15 min;自來水冷卻後,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細菌或培養(yang) 細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nei) ,離心後棄上清;按照細菌或細胞數量(104個(ge) ):試劑一體(ti) 積(mL)為(wei) 500~1000:1的比例(建議500萬(wan) 細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重複30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體(ti) :直接檢測。
計算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計算:
單位的定義(yi) :每mL血清(漿)每分鍾生成1 nmol的對硝基苯胺定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義(yi) :每mg組織蛋白每分鍾生成1 nmol 對硝基苯胺定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義(yi) :每g組織每分鍾生成1 nmol 對硝基苯胺定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義(yi) :每1萬(wan) 個(ge) 細菌或細胞每分鍾生成1 nmol 對硝基苯胺定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應體(ti) 係總體(ti) 積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光係數,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體(ti) 積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體(ti) 積,1 mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;2000:細菌或細胞總數,2000萬(wan) 。
Ⅱ類主要組織相容性複合體(ti) DQβ1xl18luck新利 MHCDQβ1免費代測試劑
Ⅰ類主要組織相容性複合體(ti) Gxl18luck新利 MHCG免費代測試劑
Ⅰ類主要組織相容性複合體(ti) Exl18luck新利 MHCE免費代測試劑
Ⅰ類主要組織相容性複合體(ti) Cxl18luck新利 MHCC免費代測試劑
9kDa信號識別顆粒xl18luck新利 SRP9免費代測試劑
98kDa核孔蛋白xl18luck新利 NUP98免費代測試劑
93kDa核孔蛋白xl18luck新利 NUP93免費代測試劑
8-羥基鳥糖苷酶1xl18luck新利 OGG1免費代測試劑
88kDa核孔蛋白xl18luck新利 NUP88免費代測試劑
85kDa核孔蛋白xl18luck新利 NUP85免費代測試劑
7-脫氫還原酶xl18luck新利 DHCR7免費代測試劑
70kDa熱休克蛋白結合蛋白1xl18luck新利 HSPBP1免費代測試劑
70kDa熱休克蛋白9xl18luck新利 HSPA9免費代測試劑
70kDa熱休克蛋白4xl18luck新利 HSPA4免費代測試劑
70kDa熱休克蛋白1樣蛋白xl18luck新利 HSPA1L免費代測試劑
糖原磷酸化酶b(GPb)測試盒50管/24樣堿性磷酶(AKP/ALP)測試盒/分光光度法
100T/48S堿性磷酶(AKP/ALP)測試盒/微量法
150ml堿性磷酶(ALP/AKP)測試盒
50管/48樣堿性磷酶(ALP/AKP)測試盒/比色法
96T堿性磷酶(ALP/AKP)測試盒/微板法
48T堿性磷酶(ALP/AKP)測試盒/微板法
50管/24樣堿性木聚糖酶(BAX)測試盒/分光光度法
100管/48樣堿性木聚糖酶(BAX)測試盒/微量法
50管/48樣焦磷:果糖-6-磷-1-磷轉移酶(PFP)測試盒/分光光度法
注意事項:
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨(lin) 用前配製,且避光保存,配製好未使用完的4℃保存且3天內(nei) 使用完畢。
2. 為(wei) 保證實驗結果的準確性,需先取1-2個(ge) 樣做預實驗,如果測定的吸光值過高(高於(yu) 2.5),用蒸餾水稀釋後再測定。
3. 與(yu) 茚三酮反應在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結果不含這兩(liang) 種氨基酸的量。
4.檢出限為(wei) 100μmol/L。