肉毒堿棕櫚酰轉移酶(CPT1)測試盒

商品詳情：
肉毒堿棕櫚酰轉移酶(CPT1)測試盒正式測定前務必取2-3個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定

測定意義(yi) ：

肉毒堿棕櫚酰轉移酶是存在於(yu) 線粒體(ti) 內(nei) 膜的一類酰基轉移酶。可逆地催化從(cong) 酰基輔酶將酰基轉移至L-肉毒堿的反應，在轉運脂肪酸通過線粒體(ti) 內(nei) 膜的過程中起重要作用。

測定原理：

基於(yu) 肉堿和脂酰輔酶在丙二酰輔酶存在與(yu) 否的條件下，通過肉堿脂酰轉移酶(CPT-I)的作用，產(chan) 生脂酰肉堿，並釋放出巰基輔酶(COA-SH)，與(yu) Ellman試劑DN-TB反應後，產(chan) 生黃色的TNB。通過其吸收峰值得變化(412nm)，來定量分析CPT-1的活性。

需自備的儀(yi) 器和用品：

可見分光光度計/酶標儀(yi) 、台式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水
樣品中AA提取：

1.按照組織質量（g）：試劑一體(ti) 積(mL)為(wei) 1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行室溫勻漿，然後轉移到1.5 mL EP 管中，蓋緊後（防止水分散失）置於(yu) 沸水浴提取15 min；自來水冷卻後，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測。

2.細菌或培養(yang) 細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nei) ，離心後棄上清；按照細菌或細胞數量（104個(ge) ）：試劑一體(ti) 積（mL）為(wei) 500~1000：1的比例（建議500萬(wan) 細菌或細胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重複30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

3.血清等液體(ti) ：直接檢測。

計算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計算:

單位的定義(yi) ：每mL血清（漿）每分鍾生成1 nmol的對硝基苯胺定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義(yi) ：每mg組織蛋白每分鍾生成1 nmol 對硝基苯胺定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義(yi) ：每g組織每分鍾生成1 nmol 對硝基苯胺定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細菌或細胞密度計算：

單位的定義(yi) ：每1萬(wan) 個(ge) 細菌或細胞每分鍾生成1 nmol 對硝基苯胺定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應體(ti) 係總體(ti) 積，2×10-4 L；ε：對硝基苯胺摩爾消光係數，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體(ti) 積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體(ti) 積，1 mL；T：反應時間，2 min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；2000：細菌或細胞總數，2000萬(wan) 。

注意事項：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨(lin) 用前配製，且避光保存，配製好未使用完的4℃保存且3天內(nei) 使用完畢。

2. 為(wei) 保證實驗結果的準確性，需先取1-2個(ge) 樣做預實驗，如果測定的吸光值過高（高於(yu) 2.5），用蒸餾水稀釋後再測定。

3. 與(yu) 茚三酮反應在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測定結果不含這兩(liang) 種氨基酸的量。

4．檢出限為(wei) 100μmol/L。

信號素3Gxl18luck新利 SEMA3G免費代測試劑

信號素3Fxl18luck新利 SEMA3F免費代測試劑

信號素3Dxl18luck新利 SEMA3D免費代測試劑

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信號傳(chuan) 導轉錄激活因子5Axl18luck新利 STAT5A免費代測試劑

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肉毒堿棕櫚酰轉移酶(CPT1)測試盒澱粉比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣

直鏈澱粉比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣

直鏈澱粉比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣

支鏈澱粉比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣

支鏈澱粉比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣

α比色法檢測試劑盒 微量法 100管/48樣

α比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣

β比色法檢測試劑盒 微量法 100管/48樣

β比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣