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蛋白質羰基測試盒

簡要描述:

蛋白質羰基測試盒是多種氨基酸在蛋白質的氧化修飾過程中的早期標誌,其含量高低表明蛋白質氧化損傷(shang) 程度的大小,是衡量蛋白質氧化損傷(shang) 的主要指標。

更新時間:2024-09-03;廠商性質:經銷商;覽量:1125

商品詳情:
蛋白質羰基測試盒測定意義(yi) :

蛋白質羰基是多種氨基酸在蛋白質的氧化修飾過程中的早期標誌,其含量高低表明蛋白質氧化損傷(shang) 程度的大小,是衡量蛋白質氧化損傷(shang) 的主要指標。

貨號

規格

檢測方法

YSH3278

100管/48樣

微量法

YSH3278-1

50管/24樣

紫外分光光度法

測定原理:

羰基與(yu) 2,4-二肼反應生成紅色2,4-二腙,在370nm處有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀(yi) 器:

天平、恒溫水浴鍋、低溫離心機、漩渦震蕩儀(yi) 、紫外分光光度計/酶標儀(yi) 、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水、無水乙醇、乙酸乙酯。
樣品中AA提取:

1.按照組織質量(g):試劑一體(ti) 積(mL)為(wei) 1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然後轉移到1.5 mL EP 管中,蓋緊後(防止水分散失)置於(yu) 沸水浴提取15 min;自來水冷卻後,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。

2.細菌或培養(yang) 細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nei) ,離心後棄上清;按照細菌或細胞數量(104個(ge) ):試劑一體(ti) 積(mL)為(wei) 500~1000:1的比例(建議500萬(wan) 細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重複30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

3.血清等液體(ti) :直接檢測。

計算公式如下:

1、血清(漿)LAP活力的計算:

單位的定義(yi) :每mL血清(漿)每分鍾生成1 nmol的對硝基苯胺定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義(yi) :每mg組織蛋白每分鍾生成1 nmol 對硝基苯胺定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義(yi) :每g組織每分鍾生成1 nmol 對硝基苯胺定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義(yi) :每1萬(wan) 個(ge) 細菌或細胞每分鍾生成1 nmol 對硝基苯胺定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應體(ti) 係總體(ti) 積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光係數,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體(ti) 積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體(ti) 積,1 mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;2000:細菌或細胞總數,2000萬(wan) 。

注意事項:

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨(lin) 用前配製,且避光保存,配製好未使用完的4℃保存且3天內(nei) 使用完畢。

2. 為(wei) 保證實驗結果的準確性,需先取1-2個(ge) 樣做預實驗,如果測定的吸光值過高(高於(yu) 2.5),用蒸餾水稀釋後再測定。

3. 與(yu) 茚三酮反應在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結果不含這兩(liang) 種氨基酸的量。

4.檢出限為(wei) 100μmol/L。

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土壤性(SACPT)測試盒50管/24樣 可見分光光度法

土壤中性(SNPT)測試盒100管/48樣 微量法

土壤中性(SNPT)測試盒50管/24樣 可見分光光度法

土壤堿性(SALPT)測試盒100管/48樣 微量法

土壤堿性(SALPT)測試盒50管/24樣 可見分光光度法

土壤芳基硫酯酶(SASF)測試盒100管/48樣 微量法

土壤芳基硫酯酶(SASF)測試盒50管/24樣 可見分光光度法

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