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　　 　（1） 酶與(yu) 抗體(ti) 的活性 常用瓊脂擴散或免疫電泳法，使抗原與(yu) 抗體(ti) 形成沉澱線，經PBS漂洗1天，再以蒸餾水浸泡1小時，將瓊脂凝膠片浸於(yu) 酶底物溶液中著色，如果出現應有的顏色反應，再用生理鹽水浸泡，顏色仍然不褪，表示結合物既有酶的活性，也有抗體(ti) 活性。良好的結合物在顯色後，瓊擴滴度應在1:16以上。另一個(ge) 測定方法是用係列稀釋的酶標抗體(ti) 直接以ELISA（酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒）方法進行方陣滴定，此法不僅(jin) 可以測定標記效果，還可以確定酶標抗體(ti) 的使用濃度。 　　（2） 結合物的定量測定 一般是對結合物中的酶和IgG進行定量測定。常用紫外分光光度計於(yu) 403nm和280nm進行測定，然後按下列公式計算： 　　酶量（mg/ml）＝OD403×0.42 　　IgG量（mg/ml）＝（OD280－OD403×0.4）×0.94×0.62 　　對於(yu) 過碘酸鈉氧化法製備的標記抗體(ti) 量，按下列公式計算： 　　IgG量（mg/ml）＝（OD280－OD403×0.34）×0.62 　　已知酶量和IgG量後，即可計算出標記抗體(ti) 的摩爾（mol）比值。 　　HRP/IgG摩爾比值＝HRP（mg/ml）/IgG（mg/ml）×4 　　結合物中酶總量＝HRP（mg/ml）×結合物溶液量 　　結合物產(chan) 率＝結合物中酶總量/標記時加入的酶量×100％ 　　用於(yu) ELISA（酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒）的結合物的酶量為(wei) 400（g/ml時效果一般，為(wei) 500（g/ml時效果較好，達 1000（g/ml時效果。mol.比值由於(yu) 結合物中含的IgG並不*可靠，所以不能作為(wei) 主要參數。一般認為(wei) mol.比值為(wei) 0.7時效果一般，1.0時效果較好，1.5-2.0時。酶結合率為(wei) 7％時效果一般，為(wei) 9％－10％較好，達30％以上時。

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